HIV-1核心蛋白p24在大肠杆菌中的表达与纯化

• 作者: 戴炜 李体远 殷震 王宏伟 郭志儒 金宁一
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 原核载体 人免疫缺陷病毒 核心蛋白 纯化
• 年，卷（期）: 1999,（9）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 394-396
• 页数: 3页
• 分类号: R373.9
• 字数: 2074字
• 语种: 中文

摘要

目的:探索进一步提高 HIV-1 p24 gag 蛋白在大肠杆菌中的表达效率,增加产物的纯化手段.方法:通过改造原核表达载体 pBV220和 pET28,构建了一种新的通用型温控原核表达载体 pVV5,将 HIV-1 gag 基因的 1 148～1 857 编码序列,插入到 pVV5b 和 pET28b 的相应位点中,构建了重组表达质粒 pEG1b 和 pEG7b,转化到大肠杆菌中进行表达,产物利用 IMAC 金属螯合层析柱进行纯化,纯化的表达产物用 HIV-1 标准阳性血清进行鉴定.结果:构建的重组表达质粒 pEG1b 和 pEG7b 在相应受体菌中表达重组蛋白的量为41%和28%,表达的外源蛋白经 IMAC 柱一步纯化后纯度超过80%,纯化后的重组蛋白可与 HIV-1 阳性血清发生 ELISA 反应.结论:构建的通用型温控原核表达载体可以高效地表达外源蛋白,在大肠杆菌中高效地表达 HIV-1 p24 可用于制备 HIV-1 感染的诊断试剂.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宏伟	长春农牧大学基因工程实验室	1	4	1.0	1.0
2	金宁一	长春农牧大学基因工程实验室	1	4	1.0	1.0
3	戴炜		1	4	1.0	1.0
4	李体远	白求恩医科大学地方病研究所	4	7	2.0	2.0
5	郭志儒	长春农牧大学基因工程实验室	1	4	1.0	1.0
6	殷震	长春农牧大学基因工程实验室	3	20	2.0	3.0