HIV-1基质蛋白P17的原核表达与纯化

• 作者: 李萍 李钟洙 杨翰仪 殷震 王宏伟 郭志儒 金宁一
• 来源期刊: 白求恩医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: HIV-1 p17 大肠杆菌 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 19-21
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 1959字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2001.01.007

摘要

目的：HIV-1p17基因在大肠杆菌中高效表达并纯化目的蛋白。方法：①PCR法扩增的HIV-1p17基因片段克隆至pET28c质粒；②重组质粒分别在大肠杆菌BL21、BL21(DE3)、BL21(DE3)plysS及HMS174(DE3)中表达；③用Ni-NTA金属树脂层析法纯化目的蛋白；④用酶联免疫法和免疫印迹法检测纯化蛋白的特异性。结果：重组质粒在BL(DE3)中表达量最高，目的蛋白表达量占全菌体裂解物的32%，纯化后其纯度达95%，纯化蛋白可与p17McAb和HIV-1阳性血清发生特异反应。结论：带有HIV-1p17片段的重组质粒pET28c在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达，蛋白表达量可满足其免疫、生物活性的进一步研究；用Ni-NTA金属树脂层析法纯化蛋白，方法简便，蛋白丢失少，纯度高；纯化的重组蛋白HIV-1p17可用来临床早期诊断HIV-1感染者，同时可预测患者的临床进程。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨翰仪	吉林大学基础医学院	23	116	6.0	10.0
2	金宁一	解放军农牧大学基因工程实验室	16	57	5.0	7.0
3	郭志儒	解放军农牧大学基因工程实验室	6	18	1.0	4.0
4	李萍	解放军农牧大学基因工程实验室	4	20	2.0	4.0
5	殷震	解放军农牧大学基因工程实验室	23	164	7.0	12.0
6	王宏伟	解放军农牧大学基因工程实验室	4	1	1.0	1.0
7	李钟洙	吉林大学第二医院皮肤科	3	1	1.0	1.0