pNZ8149-IL21基因乳酸菌表达载体的构建与表达特性

• 作者: 卓倩 徐文雨 王庆苓 袁婷 赵树立 韩煜东
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因IL21 重组质粒pUC57-IL21 重组质粒pNZ8149-IL21 乳酸乳球菌NZ3900 表达鉴定 Nisin诱导基因表达系统
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 105-109
• 页数: 5页
• 分类号: Q812
• 语种: 中文
• DOI: 10.19526/j.cnki.1005-8915.20190203

摘要

构建重组质粒pNZ8149-IL21,并将其转到乳酸球菌中,利用Nisin诱导基因表达系统分析重组质粒在乳酸球菌中的表达.采用基于聚合酶链式反应的精确合成(PCR-based accurate synthesis,PAS)的方法,合成目的基因II21,连入载体pUC57,获得重组质粒pUC57-IL21;对含有目的基因的pUC57-IL21和pNZ8149质粒进行双酶切后,构建pNZ8149-IL21质粒;采用电转化方法将连接产物转化进NZ3900,涂板挑取12个单菌落培养后,进行PCR验证,筛选出阳性克隆,从诱导剂Nisin的浓度(30,50和100 ng/mL)和诱导时间(12和24 h)进行诱导条件优化分析IL21在乳酸菌中表达.目的蛋白在乳酸菌NZ3900中得到表达,在50 ng/mL的Nisin诱导24 h可见目的蛋白在相对分子质量15 k左右有条带表达,Nisin诱导24 h的效果优于12h.结果 说明选择乳酸菌作为载体表达系统,构建IL21高表达的重组乳酸菌是可行的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卓倩	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	1	0	0.0	0.0
2	韩煜东	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	1	0	0.0	0.0
3	徐文雨	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	1	0	0.0	0.0
4	袁婷	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	1	0	0.0	0.0
5	王庆苓	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	1	0	0.0	0.0
6	赵树立	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	1	0	0.0	0.0