重组NDV HN基因乳酸菌穿梭表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 于丹 张旺 曹岩峰 王一鸣 王春凤 胡静涛 郭衍冰
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒 血凝素-神经氨酸酶 乳酸菌穿梭表达载体 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 页码范围: 184-187
• 分类号: S852.65|Q786
• 语种: 中文

摘要

为构建新城疫病毒乳酸菌穿梭表达载体,采用RT-PCR方法从新城疫病毒中扩增了HN基因,将其克隆到pMD18-T Simple Vector中.经测序鉴定正确后,定向克隆至乳酸菌表达载体pW425et中,并转化入表达宿主菌BL21 (DE3),利用IPTG诱导表达.采用SDS-PAGE和Western blotting检测重组菌在大肠杆菌中的表达情况.结果表明:NDVHN基因与表达载体pW425et正确重组,且该重组菌传50代次以上,重组质粒依然稳定.SDS-PAGE显示表达出约63 kD的条带,与已知表达的HN蛋白大小相符.Western blotting进一步证实该蛋白能被NDV阳性抗体所识别,具有反应原性.表明构建了重组NDVHN基因乳酸菌穿梭表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王春凤	吉林农业大学动物科学技术学院	134	596	12.0	16.0
2	胡静涛	吉林农业大学动物科学技术学院	22	50	4.0	6.0
3	于丹		10	14	2.0	3.0
4	王一鸣	吉林农业大学动物科学技术学院	10	34	4.0	4.0
5	郭衍冰	吉林农业大学动物科学技术学院	5	16	2.0	4.0
6	曹岩峰		5	6	1.0	2.0
7	张旺	吉林农业大学动物科学技术学院	1	5	1.0	1.0