绿色荧光蛋白标记穿梭表达载体构建及重组乳酸菌制备

• 作者: 杨桂连 王春凤 陈晓雷
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绿色荧光蛋白 穿梭表达载体 大肠杆菌 乳酸菌
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 页码范围: 325-329
• 页数: 5页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3924字
• 语种: 中文

摘要

以红霉素耐药性基因/thy A基因双筛选压力大肠杆菌-乳酸杆菌穿梭表达载体pW425et为基本骨架,将绿色荧光蛋白(GFP)基因插入该载体,构建GFP标记的穿梭表达载体pW425et-GFP.通过连续的荧光强度检测,验证gfp基因能否在重组菌中得到稳定表达.重组表达质粒pW425et-GFP酶切和PCR鉴定结果与预期片段大小相符,SDS-PAGE显示27 kD的绿色荧光蛋白获得表达,在蓝光的激发下,可见明显的绿色荧光,且荧光稳定性强,连续传代30次仍可见荧光.结果表明已成功构建了GFP标记穿梭表达载体pW425et-GFP,为乳酸菌作为益生生理菌载体进行体内定植规律研究和食品级、疫苗级乳酸菌产品的开发奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨桂连	吉林农业大学动物科技学院	99	415	11.0	14.0
2	王春凤	吉林农业大学动物科技学院	134	596	12.0	16.0
3	陈晓雷	吉林农业大学动物科技学院	2	6	1.0	2.0