表达绿色荧光蛋白重组乳酸杆菌的构建及电击转化条件

• 作者: 周风珍 孙晓刚 张玲华 李国立 田兴山
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绿色荧光蛋白 重组乳酸杆菌 质粒构建 电击
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 简报
• 页码范围: 117-119
• 页数: 3页
• 分类号: S852.6
• 字数: 2586字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-411X.2005.03.031

摘要

应用DNA重组技术构建了表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组乳酸杆菌. 将pGFP2质粒中的绿色荧光蛋白基因切下,克隆进表达载体质粒pThioHisB的NcoⅠ和SacⅠ位点之间,构建成重组表达质粒pThioGFP,然后转化大肠杆菌BL21. 从BL21中提取重组质粒,用电击法转化乳酸杆菌Lac1001,当细菌处于D600 nm为0.6的生长期时,使用PEB作为电击缓冲液,对100 μL体积的细胞悬液在电容25 μF,电阻200 Ω,电压2.2 kV的电击条件进行完整质粒转化可得到较高的转化率. 电击转化后Lac1001于LB培养基上呈绿色,在荧光透射仪下观察,整个菌体发绿色荧光. 构建的重组乳酸杆菌能够稳定表达绿色荧光蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田兴山	广东省农业科学院农业生物技术研究所	68	637	14.0	21.0
2	李国立	广东省农业科学院农业生物技术研究所	6	63	4.0	6.0
3	张玲华	广东省农业科学院农业生物技术研究所	8	136	5.0	8.0
7	周风珍	广东省农业科学院农业生物技术研究所	12	224	7.0	12.0
8	孙晓刚	广东省农业科学院农业生物技术研究所	2	10	2.0	2.0