基于竞争性互补介导核酸恒温扩增技术快速检测沙门氏菌

• 作者: 乔宇 彭晴 李堂正 杜昱光 毛瑞 陈旭
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 工学
• 关键词: 沙门氏菌 竞争性互补介导核酸恒温扩增 快速检测
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 174-179
• 页数: 6页
• 分类号: TS251.7
• 字数: 3485字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2019.02.007

摘要

食源性致病菌污染是食品安全问题的重要隐患之一,沙门氏菌是食品中最常见的食源性致病菌.为快速检测食品中的沙门氏菌,满足食品生产过程中实时检测监控的需要,基于竞争性互补介导核酸恒温扩增(competitive annealing mediated isothermal amplification,CAMP)技术,建立一种操作简便/准确性高/灵敏度高的沙门氏菌快速检测方法.以沙门氏菌invA基因保守区域片段为靶序列,利用DNAMAN设计特异性引物,并在己筛选获得沙门氏菌的CAMP引物基础上,应用CAMP引物设计推荐规则及作用位点,进行加速引物的设计和筛选,评估加速引物对扩增反应的影响;并且对建立的方法进行特异性及灵敏性的检测评估.同时与PCR方法进行比较.结果表明:以沙门氏菌invA基因为目标核酸所设计的一对CAMP引物可以实现对沙门氏菌的快速检测,而且在反应体系中引入加速引物可以将检测时间缩短15min;PCR方法的检测限为103 CFU?mL-1,而本研究所建立的方法在65℃恒温条件下80min内检出沙门氏菌,检测限为10CFU?mL-1,检测效率和灵敏度均优于传统PCR方法,而且操作简便,无需精密/复杂的变温仪器;对3株沙门氏菌和10株非沙门氏菌进行特异性检测,3株阳性对照株检测全部为阳性,10株阴性对照菌检测全部为阴性,说明本试验所建立沙门氏菌快速检测方法具有良好的特异性,而且对沙门氏菌无漏检,具有较好的通用性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	乔宇	中国农业科学院饲料研究所	29	229	8.0	14.0
2	杜昱光	中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室	152	3208	34.0	49.0
3	陈旭	沈阳农业大学食品学院	10	17	3.0	3.0
4	毛瑞	中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室	2	3	1.0	1.0
5	李堂正	黑龙江大学生命科学学院	2	2	1.0	1.0
6	彭晴	中国农业科学院饲料研究所	9	19	3.0	4.0