Hpd基因修饰制备高酪氨酸血症Ⅲ型巴马小型猪模型

• 作者: 刘闻 徐名衬 徐涛 袁进 邓俊成 陈傍柱 陈恩生 顾为望 顾鹏
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 4-羟基苯丙酮酸氧化酶 CRISPR/Cas9 高酪氨酸血症Ⅲ型 巴马小型猪
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 11-16
• 页数: 6页
• 分类号: R-33
• 字数: 4448字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2019.05.002

摘要

目的 利用CRISPR/Cas9技术敲除巴马小型猪4-羟基苯丙酮酸氧化酶(4-OH phenylpyruvate dioxygenase,4HPPD/HPD)制备高酪氨酸血症III型巴马小型猪模型.方法 分别从质粒pGL3-U6-gRNA-PGK-puromycin和pST1374-NLS-flag-linker-Cas9中通过PCR扩增sgRNA-Hpd和Cas9体外转录用模板,接着体外转录出Cas9 mRNA和sgRNA-Hpd,最后将Cas9 mRNA和sgRNA-Hpd共注射入巴马小型猪受精卵的胞质内,以制备Hpd基因敲除巴马小型猪.结果 胞质内共注射后,共移植20枚受精卵至2只代孕母猪.获得子代Hpd基因敲除巴马小型猪共4只.结论 本研究成功制备了高酪氨酸血症III型巴马小型猪模型,将为研究酪氨酸代谢通路提供更好的模型.