猪流感病毒NP蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 刘肖 张改平 李青梅 李鸽 杨艳艳 王彦红
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流感病毒 免疫过氧化物酶单层细胞试验 NP蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 129-133
• 页数: 5页
• 分类号: S852.4
• 字数: 4105字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.08.019

摘要

为了制备猪流感病毒(SIV)核蛋白(NP)的单克隆抗体(MAb),采用差速离心法纯化H1N1和H3 N2亚型SIV后交叉免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过建立的免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)单克隆抗体检测方法进行筛选.获得3株能稳定分泌抗NP蛋白的杂交瘤细胞,分别命名为16 D5、18 G8和20 C4,将它们诱导小鼠产生的腹水IPMA效价分别为1×10-6、1×10-6和1×10-5.亚型鉴定结果显示,3株单克隆抗体的重链均为IgG1,轻链为κ链.3株单克隆抗体特异识别H1 N1、H3 N2、H5 N1、H7 N9和H9 N2亚型流感病毒,并且与猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒无交叉反应.Western blot检测结果表明,3株杂交瘤细胞培养上清均在56 ku附近出现一条特异性的蛋白质条带,说明针对SIV的NP蛋白制备了3株单克隆抗体.综上,成功制备了针对SIV NP蛋白的3株单克隆抗体,可识别不同亚型的SIV.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张改平	河南农业大学牧医工程学院	103	840	15.0	24.0
4	杨艳艳	河南省农业科学院动物免疫学重点实验室	28	264	9.0	15.0
5	李青梅	河南省农业科学院动物免疫学重点实验室	12	141	6.0	11.0
9	刘肖	河南农业大学牧医工程学院	4	2	1.0	1.0
13	李鸽	河南农业大学牧医工程学院	1	0	0.0	0.0
14	王彦红	河南省农业科学院动物免疫学重点实验室	1	0	0.0	0.0