灌木柳SlSIP基因的克隆和功能验证

• 作者: 何旭东 周洁 教忠意 王保松 邢玮 黄婧
• 来源期刊: 南京林业大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 苏柳'2345' 碱性α-半乳糖苷酶 耐盐 转基因 拟南芥 功能验证
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 39-44
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2006.201808007

摘要

[目的]明确灌木柳碱性α-半乳糖苷酶基因 (Sl SIP) 的结构特征和该基因在耐盐方面的生物学功能, 为碱性α-半乳糖苷酶基因新的功能拓宽提供理论基础.[方法]以灌木柳苏柳'2345' (Salix jiangsuensis'2345') 盐胁迫48 h后的c DNA为模板, 克隆了苏柳碱性α-半乳糖苷酶基因Sl SIP.运用生物信息学方法分析其蛋白质结构、性质和亲缘关系, 利用农杆菌介导法转入拟南芥中, 通过实时荧光定量qRT-PCR方法鉴定转基因阳性植株的表达特性和盐胁迫条件下的生长状态, 从而验证转基因植株的耐盐功能.[结果]该基因编码776个氨基酸, 分子质量为84.88 ku, 理论等电点为5.85, 不稳定系数为35.74, 亲水性平均系数-0.154, 定位于内质网膜上.SlSIP的保守结构域为WFGWCTW和IDDGWQ, 催化活性位点为V.共得到11个T3代阳性转基因株系, qRT-PCR结果显示Sl SIP在3个拟南芥阳性转基因株系中表达量最高, 分别提高9、28、29倍.转基因株系在含85 mmol/L Na Cl培养基上种子萌发率高于非转基因植株, 且生长状态良好, 但非转基因植株的叶绿素含量高于转基因株系.[结论]Sl SIP基因属于GH27家族, 不仅提高了种子萌发过程中的耐盐性, 也参与了叶片发育和衰老的途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王保松		29	271	10.0	15.0
2	教忠意		45	514	11.0	21.0
3	邢玮		11	63	4.0	7.0
4	黄婧		20	17	3.0	3.0
5	周洁		11	13	2.0	3.0
6	何旭东		13	28	3.0	5.0