燕子花 ＷＲＫＹ１１ 基因克隆、结构分析及功能验证

• 作者: 叶王斌 王玲 周晟 杨娟 刘桂伶 范丽娟 东北林业大学
• 来源期刊: 东北林业大学学报
• 关键词: 燕子花 IlWRKY11基因 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2023,（7）
• 页码范围: 1-9
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13759/j.cnki.dlxb.2023.07.001

摘要

为了开发燕子花WRKY家族的功能基因资源，验证WRKY11转录因子与花期调控相关性，更好地服务于燕子花定向分子育种。以东北林业大学苗圃的燕子花(Iris laevigata)为材料，燕子花花被片为cDNA模板，克隆燕子花IlWRKY11基因，对IlWRKY11蛋白质结构进行生物信息学分析、亚细胞定位，并通过该基因转化模式植物拟南芥，开展WRKY11转录因子对花期调控方面的功能解析。结果表明：以燕子花总RNA反转录的cDNA为模板，克隆获得IlWRKY11基因的长度为888 bp,编码295个氨基酸；IlWRKY11蛋白的相对分子质量为32 291,分子式为C1398H2237N419O421S20,属于不稳定亲水性蛋白，pCAMBIA1300-IlWRKY11-GFP植物过表达载体确定IlWRKY11蛋白定位在细胞核，IlWRKY11蛋白与单子叶植物深圳拟兰(Apostasia shenzhenica)、石刁柏(Asparagus officinalis)的关系较近。过表达IlWRKY11基因的拟南芥抽薹时间和开花时间比对照提前2～3 d。通过对转基因拟南芥和转空载对照的成花期相关基因表达量进行qRT-PCR检测，推测IlWRKY11基因通过调控赤霉素途径相关基因GA20OX和春化途径基因VRN1以及年龄途径基因SPL3参与花期调控，说明IlWRKY11基因(ON399551)对燕子花花期调控具有重要作用。