西花蓟马几丁质合成酶UAP基因克隆及功能分析

• 作者: 张洁 张祥琴 李恒 林硕 王谅 田厚军 陆承聪 陈勇 陈艺欣 魏辉
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 西花蓟马 UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶 几丁质合成 RNAi
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 1419-1425
• 页数: 7页
• 分类号: S435
• 字数: 4845字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.12.009

摘要

[目的] 阐明几丁质合成通路中的关键基因UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶(UDP N-acetylglucosamine pyrophosphorylases,UAP)对西花蓟马Frankliniella occidentalis生长发育的影响.[方法] 基于西花蓟马转录组数据,克隆验证了UAP基因的开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)全长序列,命名为FoccUAP.利用RT-qPCR方法分析FoccUAP在各个组织和不同龄期的表达情况.最后通过向西花蓟马蜕皮24 h的2龄若虫显微注射dsUAP,检测沉默效率,观察其对西花蓟马生长发育的影响.[结果] FoccUAP基因开放阅读框全长1 545 bp,编码514个氨基酸,预测蛋白分子量为56.738 kDa,具有Glyco-tranf-GTA-type Super family家族的保守结构域,与等翅目、蜚蠊目、直翅目和半翅目昆虫的UAP基因亲缘关系较近.FoccUAP基因在西花蓟马各个组织都有表达,在头部和腹部相对表达量最高,触角、胸部和足相对表达量较低.该基因在虫体生长发育的各个阶段均有表达,其中2龄幼虫、蛹以及羽化后24、48、168、240 h的成虫表达量分别是1龄幼虫的1.30、2.50、1.56、2.0、2.43和2.56倍.RNAi结果表明,注射dsUAP的西花蓟马羽化率(36.3％)和注射后120 h的存活率(5.0％)均显著低于dsGFP对照组,且注射dsUAP的西花蓟马成虫出现翅膀发育不完整、胸腹部皱缩不规则等畸形现象.[结论] FoccUAP基因对西花蓟马生长发育具有重要的作用.