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摘要:
为制备犬瘟热病毒(CDV)H蛋白单克隆抗体,采用蔗糖密度梯度离心法提纯CDV-Ondetstepoort株,利用RT-PCR方法扩增其H基因截短片段(H1、H2、H3),克隆至pET-28a(+)载体并转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞中进行原核表达,用Ni-NTA亲和层析柱纯化3种截短H蛋白;以纯化病毒为抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用间接ELISA、间接免疫荧光法(IFA)和病毒中和试验分析杂交瘤细胞的生物学特性.结果 表明,纯化的截短H蛋白表达正确,以此筛选到7株能稳定分泌犬瘟热病毒和重组H2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(3B1、3B5、3C5、3D5、5A6、4G12和7B2),抗体亚类鉴定均为IgG1κ;IFA检测均为阳性,表明7种单克隆抗体特异性好;病毒中和试验测定其培养上清的抗体中和效价为24~28,诱生BALB/c小鼠腹水的抗体中和效价为1×102~1×106;间接ELISA叠加试验显示,3B5、4G12、5A6、7B2之间的叠加系数均在50%以上,表明这4种单克隆抗体识别不同抗原表位;另外,3B5、4G12、5A6、7B2还能中和当前流行的Asia 1型CDV毒株,具有较好的广谱中和活性.本研究为后续CDV感染的免疫治疗和CDV检测方法的建立提供了材料基础.
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内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 犬瘟热病毒H蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
来源期刊 中国兽医科学 学科 农学
关键词 犬瘟热病毒 H蛋白 单克隆抗体 抗病毒活性
年,卷(期) 2019,(11) 所属期刊栏目 预防兽医学
研究方向 页码范围 1383-1389
页数 7页 分类号 S852.659.5
字数 语种 中文
DOI 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0182
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 王晓丽 37 406 11.0 20.0
2 夏兴霞 24 189 7.0 13.0
3 诸玉梅 21 58 4.0 7.0
4 王永山 15 61 5.0 7.0
5 欧阳伟 6 5 2.0 2.0
6 孙伟伟 1 0 0.0 0.0
7 钱晶 6 16 3.0 4.0
8 王晶宇 1 0 0.0 0.0
9 马孙婷 3 1 1.0 1.0
10 徐业芬 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
犬瘟热病毒
H蛋白
单克隆抗体
抗病毒活性
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国兽医科学
月刊
1673-4696
62-1192/S
大16开
甘肃省兰州市盐场堡徐家坪1号
54-33
1971
chi
出版文献量(篇)
5432
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36013
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