稳定表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的CHO-K1细胞系的建立及免疫原性分析

• 作者: 卞广林 吴素芳 张强 李鹏 武乐祎 王选年 车影
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: CHO-K1 PCV2-Cap 稳转细胞系 免疫原性
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1056-1063
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.2
• 字数: 6266字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2019.05.016

摘要

建立高表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1悬浮稳转细胞系,鉴定蛋白的免疫原性,为开发新型且有效防治猪圆环病毒的亚单位疫苗奠定基础.构建重组质粒pEEl2.4 PCV2 Cap,转染CHO-K1细胞,通过加压筛选,有限稀释,细胞悬浮驯化及Western blot检测得到高表达Cap蛋白的悬浮稳转单克隆细胞株,并对该细胞株进行发酵,纯化得到的目的蛋白,通过小鼠免疫验证其免疫原性.结果表明PCV2-Cap蛋白能够在CHO-K1细胞中正确表达;发酵过程中活细胞密度高达6×106个·mL-1,细胞活力在80％以上,PCV2-Cap蛋白表达量约为370 mg·L-1;利用间接ELISA检测小鼠免疫后血清中的抗体水平,证明了利用CHO-K1细胞生产的Cap蛋白具备良好的免疫原性.本研究成功构建了表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1悬浮稳转细胞系,并进一步对目的蛋白进行免疫原性分析,为猪圆环病毒亚单位疫苗的开发打下扎实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李鹏	新乡学院生命科学与技术学院生物技术研究中心	22	24	3.0	4.0
2	武乐祎	新乡学院生命科学与技术学院生物技术研究中心	2	7	1.0	2.0
11	吴素芳		1	0	0.0	0.0
12	车影		1	0	0.0	0.0
13	张强		1	0	0.0	0.0
14	卞广林		1	0	0.0	0.0