miR-33靶向调控鸡CHPT1基因表达

• 作者: 李辉 王星果 邵芳 郁建锋 顾志良
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡 miR-33 胆碱磷酸转移酶1基因(CHPT1) 脂类代谢 基因表达
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 118-126
• 页数: 9页
• 分类号: S831|Q291
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2019.01.013

摘要

miR-33在脂类代谢过程中具有重要作用,同时还参与葡萄糖代谢、炎症反应以及细胞周期等多种生理过程.目前对于鸡(Gallus gallus) miR-33的功能及其与预测靶基因一胆碱磷酸转移酶1基因(choline phosphotransferase 1,CHPT1)的作用关系尚不明确.本研究旨在对鸡miR-33预测靶基因CHPT1进行实验验证,探讨鸡miR-33对CHPT1的靶向调控作用.首先利用生物信息学方法,在鸡3'-UTR数据库中共预测到378个miR-33的靶基因,包括与脂类代谢相关的CHPT1基因;然后构建miR-33过表达载体和CHPT1荧光素酶报告载体,共转染小鼠(Mus musculus)成肌细胞系C2C12,结果显示,miR-33的种子区与CHPT1预测靶位点结合,CHPT1基因表达因此被抑制;点突变实验证实了miR-33与CHPT1结合的靶位点.设计并合成miR-33拮抗物LNA (locked nucleic acid)-antimiR-33,转染鸡原代肝细胞后使miR-33表达水平下降44％,而CHPT1基因表达量有一定程度上升.利用qRT-PCR技术对miR-33的表达进行分析,结果显示,miR-33在鸡不同组织中均有表达,在肌胃和心脏中的表达量较高,在其他组织中等表达;miR-33在肌胃中的表达量与脾脏、肾脏、脑和腺胃中的表达量差异显著(P＜0.05),与肝脏和腿肌中的表达量差异极显著(P＜ 0.01);miR-33在4周龄高脂肉鸡肝脏和腹脂组织中的表达量显著高于低脂肉鸡(P＜0.05);靶基因CHPT1在高脂肉鸡腹脂组织中的表达量显著高于低脂肉鸡(P＜0.05).上述实验结果提示,miR-33与鸡脂类代谢和脂肪沉积相关,CHPT1基因是其潜在的靶基因.本研究为揭示鸡脂类代谢调控机理提供了新的线索.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵芳		9	13	2.0	3.0
3	李辉	东北农业大学动物科学技术学院	142	1989	22.0	39.0
4	顾志良	常熟理工学院生物与食品工程学院	65	234	8.0	12.0
5	郁建锋	常熟理工学院生物与食品工程学院	53	317	10.0	15.0
8	王星果	常熟理工学院生物与食品工程学院	12	2	1.0	1.0