溆浦鹅ADSL基因的克隆及其结构与表达分析

• 作者: 刘耀文 曲湘勇 柳序 蒋隽 贺长青 郭松长
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 溆浦鹅 腺苷琥珀酸裂解酶基因(ADSL) 克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 289-296
• 页数: 8页
• 分类号: S872
• 字数: 5137字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2019.02.011

摘要

腺苷琥珀酸裂解酶(adenylosuccinate lyase,ADSL)属于天冬氨酸酶/延胡索酸酶超级家族成员,在嘌呤核苷酸起始合成和嘌呤核苷酸循环中发挥重要作用,同时对改善肌肉风味具有重要意义.为研究溆浦鹅(Anser cygnoides)ADSL在不同组织中的表达规律,本研究以溆浦鹅为实验对象,利用eDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术对溆浦鹅ADSL基因序列进行克隆,并对其核酸序列及蛋白进行生物信息学分析,同时利用qRT-PCR技术检测ADSL基因在80日龄溆浦鹅不同组织中的表达量.结果显示,克隆获得的溆浦鹅ADSL基因序列(GenBank No.MK161097)全长为l 496 bp,其中5'UTR为202bp,3'UTR为31 bp,ORF为1 263 bp,编码420个氨基酸,无信号肽位点,属于非分泌蛋白;亚细胞定位预测结果显示,该基因主要存在于细胞质中,为不稳定亲水性蛋白;同源性分析显示,溆浦鹅ADSL基因与浙东白鹅、绿头鸭(Anas platyrhynchos)、原鸡(Gallus gallus)、野鸽(Columba livia)的同源性分别为99.68％、88.33％、85.64％、82.24％,以该基因构建系统发育树,发现溆浦鹅与浙东白鹅的亲缘关系最近,其次是绿头鸭和原鸡,与哺乳动物的亲缘关系较远;ADSL基因在各组织中的表达结果显示,该基因在各组织中均有表达,表达量由高至低依次为胸肌、腿肌、肝脏、皮脂、腹脂,其中胸肌表达量显著高于皮脂、腹脂(P＜0.05).本研究结果为进一步研究溆浦鹅ADSL基因在鹅肉品质中的作用机制提供了参考资料.