TRPM2离子通道在H9N2流感病毒感染小鼠肺微血管内皮细胞线粒体损伤中的作用

• 作者: 张瑞华 张雅琪 徐彤 徐明举 李军 李珮瑶 梁亭 王少华 罗强 高晶萍
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: TRPM2离子通道 H9N2流感病毒 短发卡RNA PMEVC 线粒体损伤
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 2053-2060
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.5|S852.33
• 字数: 5544字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2019.10.011

摘要

旨在探讨瞬时电位受体M2离子通道(TRPM2)在H9N2流感病毒感染小鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)导致线粒体损伤过程中的作用.在已建立TRPM2 shRNA PMVEC的基础上,采用5MOI H9N2猪流感病毒感染细胞,在病毒作用后24和48 h提取各组细胞的线粒体进行蛋白定量,检测各组细胞线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮合成酶(NOS)、线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性和ATP酶水平;利用激光共聚焦显微镜观察线粒体膜电位变化(JC-1染色)及细胞凋亡(Annexin V-FITC/PI双染色法)情况.结果 表明:H9N2-SIV感染后TRPM2 shRNA PMVEC内SOD活性、GSH水平和Na+-K+-ATP、线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性显著高于对照shRNA PMVEC(P＜0.05或P＜0.01);mtNOS活性则极显著低于shRNA PMVEC(P＜0.01).JC-1染色显示TRPM2-siRNA PMVEC线粒体膜电位水平高于对照shRNA PMVEC,但是AnnexinV-FITC/PI染色显示细胞凋亡则低于H9N2感染对照shRNA PMVEC.结果 提示:TRPM2基因沉默有效减缓H9N2感染导致NOS产生,显著降低SOD、GSH、线粒体呼吸链复合物Ⅳ、Na+-K+-ATP的消耗以及线粒体膜电位的下降程度,进而有效缓解PMVEC线粒体损伤及细胞凋亡.