TRPM2在H9N2猪流感病毒感染小鼠PMVEC损伤中的表达与作用

• 作者: 张瑞华 张雅琪 徐彤 李军 李珮瑶 梁亭 王少华 罗强 高晶萍
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: H9N2猪流感病毒 瞬时电位受体阳离子通道M2 肺微血管内皮细胞 细胞凋亡 氧化应激
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2241-2246
• 页数: 6页
• 分类号: R363.2|R329.2+1
• 字数: 4620字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2019.12.020

摘要

目的:探讨瞬时受体电位阳离子通道 M2(TRPM2)在 H9N2猪流感病毒(H9N2-SIV)感染小鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)损伤中的表达与作用.方法:采用 H9N2-SIV感染小鼠PMVEC(每组设立 3个重复).在病毒感染后 24 h和 48 h进行采样,根据试剂盒方法测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、活性氧簇(ROS)和一氧化氮合成酶(NOS)的变化;电镜观察 PMVEC超微结构变化;利用 Transwell培养 PMVEC单层细胞,测定跨膜电阻及辣根过氧化物酶渗出率;real-time PCR和 Western blot方法检测 TRPM2 mRNA与蛋白的表达;采用 Annexin V/PI双染法观察病毒感染细胞的凋亡情况.结果:H9N2-SIV感染后小鼠 PMVEC 中 GSH-Px和SOD活性显著下降,而 ROS水平和 NOS活性显著高于未感染对照组(P＜0.01);病毒感染细胞细胞器明显减少,出现空泡化结构,线粒体基质减少,细胞发生凋亡;病毒感染后跨膜电阻值明显降低,辣根过氧化物酶渗出率则显著增加;TRPM2 mRNA和蛋白表达随病毒感染时间增加显著升高(P ＜ 0.01);Annexin V/PI双染法显示病毒感染细胞的胞膜荧光显著增强,同时大量细胞的胞核显现红色,表明大量细胞发生凋亡现象.结论:TRPM2在 H9N2-SIV感染 PMEVC过程中表达明显增强,提示其参与了四N2-SIV感染导致的 PMVEC损伤和凋亡过程.