人参糖肽的结构及其对Aβ25-35处理PC12细胞的抗凋亡作用

• 作者: 姜瑞芝 朱迪夫 罗浩铭 胡婧婷 贺明 邱智东 陈英红
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人参 糖肽 细胞凋亡 细胞周期 β-淀粉样蛋白
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 286-293
• 页数: 8页
• 分类号: R285.5
• 字数: 5658字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190213

摘要

目的:研究人参糖肽的结构,探讨其对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)处理PC12细胞凋亡的保护作用,为开发人参抗阿尔茨海默病(AD)药物奠定理论基础.方法:采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)与Q Exactive Orbitrap质谱联用分析人参糖肽结构.将鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞分为6组,加入含不同浓度(0、6.25、12.50、25.00、50.00和100.00 μmol·L-1)Aβ25-35的培养基,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法测定PC12细胞的存活率.将PC12细胞分为空白对照组、模型组和给药组,模型组加入含有50.00 μmol·L-1 Aβ25-35的培养基,给药组加入不同浓度(0.03、0.10、0.30和1.00 g·L-1)人参糖肽和含有50.00 μmol·L-1 Aβ25-35的培养基.采用CCK-8法测定PC12细胞的存活率,采用Annexin Ⅴ-FITC/PI法测定人参糖肽和Aβ25-35处理后PC12细胞的凋亡率.将PC12细胞分为空白对照组、模型组和人参糖肽给药组,模型组加入含有50.00 μmol·L-1Aβ25-35的培养基,给药组加入不同浓度(0.10和0.30 g·L-1)人参糖肽和含有50.00 μmol·L-1Aβ25-35的培养基,采用流式细胞术测定不同细胞周期PC12细胞的百分比.结果:人参糖肽结构分析得到肽链为NLSHYHSGSS、糖基为N1-HexNAc,肽链为SGSSSSSSSEDDG MGR、糖基为S6-HexNAc等20多个人参糖肽结构.当Aβ25-35浓度为50 μmol·L-1时,PC12细胞存活率为(55.45±2.34)％;与空白对照组比较,不同浓度Aβ25-35处理组PC12细胞存活率明显降低(P＜0.01).与空白对照组比较,模型组PC12细胞存活率明显降低(P＜0.01);与模型组比较,给药组细胞存活率明显升高(P＜0.05).与空白对照组比较,模型组PC12细胞凋亡率升高(P＜0.01);与模型组比较,给药组细胞凋亡率降低(P＜0.05).与空白对照组比较,模型组S期PC12细胞百分比升高(P＜0.05);与模型组比较,给药组S期PC12细胞百分比降低(P＜0.05).结论:利用质谱法分析得到人参糖肽结构.人参糖肽可有效抑制Aβ25-35处理PC12细胞的凋亡,具有神经细胞保护作用,其抗凋亡活性作用可能与抑制细胞S期阻滞有关.