H9N2亚型禽流感病毒和新城疫病毒混合感染环介导间接PCR鉴别方法的建立与评估

• 作者: 李华玮 王永芬 王老七 赵绪永 郑保亮 郑鸣 郭宏伟 魏露露
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 新城疫病毒 双探针 环介导间接PCR
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1085-1090
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.06.08

摘要

根据GenBank中禽流感病毒(AIV)的HA基因和新城疫病毒(NDV)的F基因序列保守性,分别设计2条序列相邻的特异性探针,标记于不同大小的拟南芥TOC1基因片段两端,作为报告基因,建立了AIV和NDV双重环介导间接PCR鉴别方法,AIV和NDV扩增片段大小分别为200,270 bp.结果 表明,所建立的方法对AIV和NDV核酸样品可扩增出特异性目的片段,而传染性法氏囊病病毒(IBDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡痘病毒(FPV)和鸡马立克病病毒(MDV)的核酸样品未见明显扩增;对AIV和NDV核酸样品检测的最低极限质量浓度分别为25.0,12.5 μg/L;该方法特异性好、灵敏度高,2种病原同时检测不影响检测特异性和灵敏性.97份临床样本检测结果表明,环介导间接PCR对AIV和NDV的检出率分别为15.5％和27.8％,分别高于常规PCR的12.4％和23.7％,接近于SybrGreen实时PCR的15.5％和28.9％;Kappa一致性检验显示,环介导间接PCR、SybrGreen实时PCR 2种方法对AIV和NDV检测的结果高度符合,Kappa值分别为κ=0.92和κ=0.87.本试验成功建立了AIV/NDV双重环介导间接PCR检测方法,适用于临床上2种病原的快速鉴别诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭宏伟		17	16	2.0	2.0
2	王永芬		44	135	6.0	9.0
3	李华玮		16	23	3.0	4.0
4	郑鸣		15	20	2.0	3.0
5	赵绪永		9	23	2.0	4.0
6	王老七		6	4	2.0	2.0
7	魏露露		2	2	1.0	1.0
8	郑保亮		1	2	1.0	1.0