建兰花叶病毒RT-LAMP检测方法的建立

• 作者: 叶秀仙 樊荣辉 罗远华 钟淮钦 黄敏玲
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 建兰花叶病毒 RT-LAMP 检测
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 植物病理、作物病虫害及其防治
• 页码范围: 541-545
• 页数: 5页
• 分类号: S436.8
• 字数: 2675字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2019.03.018

摘要

建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CyMV)是侵染兰花的主要病毒,严重影响其观赏价值,建立快速、灵敏的检测方法显得尤为重要.根据CyMV的外壳蛋白基因序列设计4对特异性引物,经过优化反应条件,建立该病毒的RT-LAMP检测方法,并进行LAMP检测的特异性、敏感性检测.该方法能特异扩增CyMV,与其他4种病毒(齿兰环斑病毒、菜豆黄花叶病毒、黄瓜花叶病毒和小苍兰花叶病毒)不发生反应;灵敏度为RT-PCR的10倍.田间检测20份样品中,RT-LAMP和RT-PCR检测结果一致,检出率为60％.在产物中加入荧光染料SYBR GreenⅠ,直接用肉眼观察就可判断样品是否感染CyMV,可省去电泳分析的时间.针对CyMV建立的RT-LAMP方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点,适用于在进境检疫及种苗繁育过程中的检测鉴定.