枇杷果实EjNADP-ME2基因及启动子克隆与表达分析

• 作者: 寇燕 杨俊 郑国华 郑雪莲 郭傲 陈旭 高欢欢
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 枇杷 果实 细胞质型苹果酸酶 基因表达分析 启动子
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 490-498
• 页数: 9页
• 分类号: S667.3
• 字数: 6001字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2019.03.011

摘要

以'解放钟'和'白梨'果实为材料,研究基于转录组筛选出的表达量较高且在2个品种中有差异的EjNADP-ME2(Unigene0001461)基因,采用RACE和RT-PCR技术成功克隆EjNADP-ME2的cDNA全长.系统进化树分析表明,EjNADP-ME2与苹果的NADP-ME基因关系最近.生物信息学预测结果显示,EjNADP-ME2蛋白应该位于细胞质中.用染色体步移法成功克隆了EjNADP-ME2的启动子序列,序列预测该基因启动子区域含有水杨酸、茉莉酸、脱落酸响应的顺式作用元件,此外还有厌氧诱导元件、MYB和MYC参与黄化和干旱诱导的结合位点MBS.荧光定量PCR分析表明,EjNADP-ME2基因的表达量变化趋势在2个品种中大致相同,均呈现出先降低后升高又降低的趋势,且该基因在低酸品种的表达量稍低于高酸品种.相关性分析结果显示,低酸品种EjNADP-ME2基因转录水平与苹果酸含量呈显著负相关.本研究的结果为进一步探究EjNADP-ME2基因在苹果酸代谢途径中的功能奠定坚实基础.