表达双基因的重组新城疫病毒载体的构建

• 作者: 李德山 肖莉杰 高超
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 重组新城疫病毒 反向遗传学 双基因 生长曲线 免疫荧光试验 增强型绿色荧光蛋白 红色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 兽医科学
• 页码范围: 87-90,178-179
• 页数: 1页
• 分类号: S852.65+9.5|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2019.01.0302

摘要

为了构建表达双外源基因的重组新城疫病毒载体,试验采用分子生物学方法对重组新城疫病毒进行了研究.通过反向遗传学操作构建并拯救表达双基因的重组新城疫病毒[rClone30-EGFP(NP/P)-RFP (P/M)];用重组新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞并绘制生长曲线;通过免疫荧光试验检测重组新城疫病毒感染HepG2细胞后荧光蛋白的表达情况.结果 表明:试验成功构建并拯救了表达双基因的重组新城疫病毒;重组新城疫病毒的生长动力学与亲本病毒相似,差异不显著(P＞0.05);重组新城疫病毒能够在HepG2细胞中稳定表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和红色荧光蛋白(RFP).说明重组新城疫病毒感染HepG2细胞后可稳定表达双外源基因.