以烟草花叶病毒为载体的μE3单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 李旭 魏德强
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 烟草花叶病毒 半抗原 游离雌三醇 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2019,（20）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 2509-2512
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11|R392-33
• 字数: 3249字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2019.20.014

摘要

目的:获得半抗原雌三醇(μE3)高特异性和高亲和力的单克隆抗体.方法:本研究利用烟草花叶病毒(TMV)作为抗原的载体,通过化学方法与半抗原雌三醇(μE3)连接形成TMV-EPMK-μE3复合体,利用该复合体免疫小鼠,再通过杂交瘤筛选技术来获得具有高亲和力的μE3单克隆抗体.结果:TMV-EPMK-μE3免疫的小鼠血清效价达到1:100000,通过细胞融合及筛选获得4株分泌抗体效价较高的杂交瘤细胞,然后进行了亚克隆,分别命名为TE1-1、TE2-1、TE3-1和TE 4-1.抗体的效价均在10-8左右,最低检测限约为1 ng.SDS-PAGE电泳结果显示4株抗体分别在25 kD和50 kD处各有一条清晰的条带,纯度都在95％ 以上.获得的4株抗体通过罗氏亚型鉴定试剂盒测定轻链类型均为 κ;TE2-1和TE4-1单抗重链为IgG2a、TE1-1和TE3-1单抗重链为IgG2b.TE1-1和TE3-1为TMV-EPMK-μE3的特异性抗体.结论:利用烟草花叶病毒(TMV)作为抗原载体,提高了半抗原μE3免疫原性,进而使μE3能够刺激机体产生有效免疫应答.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏德强	东北林业大学生命科学学院	10	22	3.0	4.0
2	李旭	东北林业大学生命科学学院	9	14	2.0	3.0