链霉菌来源谷氨酰胺合成酶GLnA_Shy的性质表征

• 作者: 冯雁 刘璋敏 刘辉 崔莉 李谦
• 来源期刊: 南京工业大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 谷氨酰胺合成酶 大肠杆菌 同源建模 链霉菌 克隆表达
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术与大健康
• 页码范围: 249-256
• 页数: 8页
• 分类号: Q814
• 字数: 5442字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7627.2020.02.017

摘要

在大肠杆菌BL21 (DE3)中对吸水链霉菌5008的GLny_Shy基因进行克隆表达.GLnA_Shy蛋白由469个氨基酸组成,其分子量约为5.2×104.体外酶学性质及酶动力学测定结果显示,GLnA_Shy酶催化反应的最适温度为35℃,最适pH为7.5,对底物谷氨酸的米氏常数(Km)和催化常数(kcat)分别为(21.8±3.2) μmol/L和(3.8±0.5)×10-3 s-1.进化树分析和同源建模结果显示GLnA_Shy蛋白属于谷氨酰胺合成酶(GS)家族,该酶包含一个较小的N端结构域(残基区域为16～94)和一个较大的C端结构域(残基区域为101～466),其三级结构具有GS典型的双通道结构,与底物谷氨酸的结合位点为Glu131、Ser264、Arg320和Arg359.谷氨酰胺合成酶在含氮化合物的生产上应用广泛,通过解析GLnA_Shy的功能,为进一步对其进行定点改造提供了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李谦	中国药科大学生命科学与技术学院	50	268	11.0	15.0
2	刘辉	上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室	20	79	5.0	8.0
3	冯雁	上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室	15	10	2.0	2.0
4	刘璋敏	上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室	4	2	1.0	1.0
5	崔莉	上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室	4	2	1.0	1.0