TauT转基因大鼠的构建及鉴定

• 作者: 么秀华 仝慧慧 徐立霞 王辰 范维佳 莫丽冬 黄慧玲 齐浩铭
• 来源期刊: 天津医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 牛磺酸转运体 大鼠 转基因
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: R332
• 字数: 4968字
• 语种: 中文

摘要

目的:为研究牛磺酸转运体(TauT)在神经系统疾病中的作用,构建并繁育脑特异性表达TauT转基因模型大鼠(TauT+/-大鼠).方法:将TAUT cDNA插入脑特异性PDGF启动子下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立TAUT转基因大鼠.Genotype鉴定转基因大鼠的基因型.经过配种繁殖和鉴定后,绘制2～8月龄生长曲线、测定各脏器质量、脏体系数和脏脑系数;RT-PCR技术检测TauT+/-大鼠大脑组织中Slc6a6 mRNA基因表达水平;Western blot检测TauT+/-大鼠在大脑、心、肝组织的TauT蛋白表达,并对TauT+/-大鼠大脑组织进行免疫组化染色和HE染色,IPP软件对免疫组化图像进行处理.结果:成功构建PDGF-Slc6a6表达质粒,得到3只TauT+/-大鼠F0代.经过繁殖和鉴定,与同窝阴性大鼠(TauT-/-大鼠)比较,TauT+/-大鼠大脑组织Slc6a6 mRNA基因表达水平显著升高,大脑、心、肝组织TauT蛋白表达水平没有显著性差异,HE染色和免疫组化结果显示TauT+/-大鼠脑组织海马区和皮层区未见异常,TauT蛋白表达没有显著性差异.结论:成功构建TauT转基因大鼠品系,为后续研究TauT在大脑中的作用提供一种较好的动物模型.