山羊PHKG1基因克隆及其表达特性分析

• 作者: 何小芳 张浩 朱江江 李鑫 林亚秋 王永 王雨雪 郑建莹
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊 PHKG1 基因克隆 组织表达 时序表达
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 195-202
• 页数: 8页
• 分类号: Q78|S826
• 字数: 5340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.20190880

摘要

为获得山羊PHKG1基因序列,明确其生物学特征,阐明其在山羊各组织及诱导分化不同阶段皮下和肌内脂肪细胞中的表达特性,以简州大耳羊为试验动物,屠宰后采集心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、背最长肌、皮下脂肪等组织样品,提取组织中总RNA,利用RT-PCR方法克隆山羊PHKG1基因序列,利用各种在线工具分析其生物学特性,利用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qPCR)技术检测其在各个组织及不同分化阶段的前体脂肪细胞中的表达水平.结果显示,克隆得到的山羊PHKG1基因序列1233 bp,其中CDS区1164 bp,共编码387个氨基酸,形成无信号肽的不稳定亲水酸性非跨膜蛋白,亚细胞定位显示其主要存在细胞质中;山羊PHKG1氨基酸序列与绵羊、牛、猪、马、人的相似性均在90％以上,说明该基因在不同物种中具有较高保守性;构建进化树显示,山羊和绵羊在同一分支,符合物种进化规律;组织表达谱显示,PHKG1基因在山羊心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、背最长肌、皮下脂肪中广泛表达,且在背最长肌中表达水平最高(P<0.01),时序表达谱显示,PHKG1基因在成脂诱导分化60 h的肌内脂肪细胞和96 h的皮下脂肪细胞中的表达水平分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)高于前体脂肪细胞中的表达水平.结果可为进一步研究PHKG1在山羊脂肪细胞分化过程中的作用奠定基础.