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猪瘟Erns蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及其抗体间接ELISA方法的建立
猪瘟Erns蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及其抗体间接ELISA方法的建立
作者:
任杰
余兴龙
凌同
张磊
李岱霞
李润成
葛猛
郑金
黎满香
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
猪瘟病毒
Erns蛋白
杆状病毒表达系统
抗体
间接ELISA
摘要:
将人工合成的CSFV Erns基因插入到pFastBac1获得重组转移载体pFastBac1-Erns,在DH10Bac大肠杆菌中转座后提取杆粒并转染Sf9细胞,用获得的重组杆状病毒感染High Five细胞表达Erns蛋白并通过亲和层析进行纯化.以纯化后Erns蛋白作为诊断抗原,通过摸索抗原包被量和抗体血清稀释倍数等条件,建立检测CSFV Erns抗体的间接ELISA方法(Erns-iELISA).结果 显示,Erns蛋白得到有效表达,相对分子质量约为35 000;确定的ELISA抗原包被量为120 ng/孔、血清稀释100倍,酶标二抗稀释6 000倍,封闭条件为37℃30 min,TMB底物作用15 min,临界值为0.329.用Erns-iELISA方法检测92份阴性血清,其特异性为88.04%,与猪圃环病毒2型、猪繁殖与呼吸系统综合征病毒和猪流行性腹泻病毒阳性血清均无交叉反应;对171份阳性血清的敏感性为92.98%;批内和批间重复的平均变异系数为7.4%和10.74%.结果 表明,本试验所建立的Erns-iELISA方法重复性好,具有较高的检测特异性,且对CSFV疫苗毒和国内流行毒株都具有较高的检测敏感性,具有潜在的开发和应用价值.
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文献信息
篇名
猪瘟Erns蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及其抗体间接ELISA方法的建立
来源期刊
中国兽医学报
学科
农学
关键词
猪瘟病毒
Erns蛋白
杆状病毒表达系统
抗体
间接ELISA
年,卷(期)
2020,(3)
所属期刊栏目
预防兽医学
研究方向
页码范围
450-456
页数
7页
分类号
S852.65
字数
语种
中文
DOI
10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.03.02
五维指标
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
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引文网络
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(36)
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(16)
参考文献
(19)
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研究主题发展历程
节点文献
猪瘟病毒
Erns蛋白
杆状病毒表达系统
抗体
间接ELISA
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国兽医学报
主办单位:
吉林大学
出版周期:
月刊
ISSN:
1005-4545
CN:
22-1234/R
开本:
大16开
出版地:
长春市西安大路5333号
邮发代号:
12-105
创刊时间:
1981
语种:
chi
出版文献量(篇)
7291
总下载数(次)
8
总被引数(次)
50005
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