牙鲆JNK2基因的表达分析及免疫功能探究

• 作者: 于海洋 司瑜 张全启 王宣刚 王志刚 王梦娅 王欣桐
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 牙鲆 JNK2 迟缓爱德华氏菌 先天免疫
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 12-22
• 页数: 11页
• 分类号: Q75
• 字数: 6913字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20190327001

摘要

本研究利用实验室已建牙鲆(Paralichthys olivaceus)转录组数据库,得到牙鲆JNK2基因(PoJNK2)并利用PCR技术进行序列验证.PoJNK2的开放阅读框长度为1263 bp,编码420个氨基酸;通过SMART服务器对PoJNK2的结构域进行预测,显示PoJNK2具有典型的丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶催化结构域S TKc.利用qRT-PCR分析PoJNK2在牙鲆成体不同组织中的表达水平,发现其在牙鲆免疫组织中均有表达,因此,初步推测PoJNK2在牙鲆免疫应答方面可能发挥作用.本研究设计了体内迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)侵染实验和体外免疫刺激细胞实验以探究PoJNK2在牙鲆免疫反应中的作用.在迟缓爱德华氏菌体内注射牙鲆成体后,PoJNK2在脾脏、头肾和鳃中有不同程度的表达上调.同时,使用迟缓爱德华氏菌、Poly I:C和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激牙鲆鳃细胞系后,发现PoJNK2在不同时间点表达上调.除此之外,通过细胞转染实验在牙鲆鳃细胞系中过表达P oJNK2,发现其对下游炎症细胞因子的表达及激活蛋白Activator protein-1 (AP-1)的转录活性具有显著的上调作用,进一步阐明了PoJNK2在调节牙鲆免疫应答方面的作用.