肠炎沙门菌sifA基因缺失株的无痕构建及其在巨噬细胞内的增殖特性研究

• 作者: 丁炜 刘桂凤 张健 杨家兴 潘志明 焦新安 王洋 王耀楠 耿士忠 蔡媛
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肠炎沙门菌 同源重组 sifA基因 胞内增殖
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 178-186
• 页数: 9页
• 分类号: R378.2|Q93-31
• 字数: 7925字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2020.00.002

摘要

目的 本研究旨在探究sifA基因对肠炎沙门菌胞内寄生和增殖的影响,以探索肠炎沙门菌的致病机理.方法 根据同源重组原理,无痕构建肠炎沙门菌C50041的sifA基因缺失株,通过蓝白斑、抗生素耐药性、PCR和基因测序方法对基因缺失株进行鉴定,并从生物学特性、胞内沙门菌增殖、sifA基因在胞内外菌中表达等方面,分析sifA基因对肠炎沙门菌的影响.结果 成功构建肠炎沙门菌C50041AsifA,蓝白斑、抗生素耐药性、PCR和基因测序方法证明该菌株是正确的.其生长速度和生化特性没有发生改变.△sifA株感染巨噬细胞后,其胞内沙门菌量显著少于其野生株.sifA基因在spiC基因缺失株中表达量增加.结论 肠炎沙门菌C50041△sifA被成功构建,其在巨噬细胞内的增殖量显著降低,sifA基因表达可能受spiC基因调控,本研究为深入探究肠炎沙门菌在细胞内增殖及sifA基因的功能奠定基础.