H4、N2和所有亚型禽流感三重RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 张民秀 张艳芳 曾婷婷 李丹 李孟 王盛 罗思思 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文 黄娇玲
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感 H4亚型 N2亚型 三重RT-PCR
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 微生物与免疫
• 页码范围: 16-21
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3010字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11751/ISSN.1002-1280.2020.02.03

摘要

为建立一种同时检测H4、N2和所有亚型禽流感的方法,分别针对H4亚型禽流感病毒(AIV)HA基因、N2亚型AIV NA基因和所有亚型AIV M基因保守序列,设计筛选出3对特异性引物,优化引物之间的浓度,对三重反应体系进行特异性和敏感性验证,建立了H4、N2和所有亚型AIV三重RT-PCR检测方法,并用该法对临床样品进行检测.建立的方法能特异性扩增H4、N2和所有亚型AIV,与其他禽病病原体不发生交叉反应;对H4、N2和所有亚型AIV至少能检测到6 pg/μL.在185份临床样品的检测中,检出4份H4、10份N2和19份AIV阳性.所建立的三重RT-PCR方法特异性强、灵敏度高,为快速检测H4、N2和所有亚型AIV提供了有效的方法.