栉孔扇贝消化盲囊亚细胞组分分离与鉴定技术

• 作者: 李禹含 潘鲁青 陈维 魏守祥
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 栉孔扇贝 消化盲囊 亚细胞组分 分离鉴定
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 111-118
• 页数: 8页
• 分类号: S917.4
• 字数: 5439字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20190214001

摘要

采用匀浆、差速离心、镜检和标志酶测定等方法,研究了栉孔扇贝(Chlamys farreri)消化盲囊亚细胞组分分离与鉴定技术.结果 显示,经Hoechst 33258染色,在匀浆2 min对照组中,观察到大量栉孔扇贝消化盲囊完整细胞,呈圆形或椭圆形,细胞膜完整,荧光强度较高;在匀浆3、4、5 min实验组中,完整细胞数目逐渐减少,且出现许多形态较小、荧光强度弱、轮廓模糊的细胞碎片.通过血球计数板法得到的细胞破碎结果与上述染色结果一致,随着匀浆时间(2～5 min)的增加,细胞破碎率升高,当匀浆时间达到5 min时,细胞破碎率升至94.24％.利用Hoechst 33258染色栉孔扇贝消化盲囊亚细胞分离组分(S2、C2、C4、S5和C5),镜检发现,C2组分荧光强度最强,荧光颗粒数目多,而其他组分荧光强度弱,且基本观察不到荧光颗粒.由此推测,细胞核主要存在于C2组分中;同时,细胞膜(5'-核苷酸酶)、线粒体(琥珀酸脱氢酶)、细胞质(乳酸脱氢酶)和微粒体(葡萄糖-6-磷酸酶)标志酶活力在其他亚细胞组分中有少量检出,但它们在S2、C4、S5和C5组分中的的标志酶活性比例较高(分别为63.90％、64.89％、77.82％和67.55％).由此推测,S2、C2、C4、S5和C5分离组分分别为细胞膜、细胞核、细胞质、线粒体和微粒体.本研究成功构建了栉孔扇贝消化盲囊亚细胞组分分离与鉴定技术方法,为贝类生理机制研究提供技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘鲁青	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	102	1937	24.0	39.0
2	陈维	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0
3	魏守祥	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0
4	李禹含	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0