亚砷酸钠诱导SH-SY5Y细胞铁死亡的规律

• 作者: 任学科 夏双爽 李玲 王慧 田凤(絜) 穆箭兵 郑金平
• 来源期刊: 环境与职业医学
• 学科: 医学
• 关键词: 亚砷酸钠 人神经母细胞瘤细胞 铁死亡
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 原创精选
• 页码范围: 468-473
• 页数: 6页
• 分类号: R114
• 语种: 中文
• DOI: 10.13213/j.cnki.jeom.2020.19707

摘要

[背景]砷可通过诱导神经元丢失导致神经毒性,但其是否可诱导神经细胞铁死亡尚不清楚.[目的]探讨亚砷酸钠(NaAsO2)诱导人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y铁死亡发生规律,为研究NaAsO2神经毒性发生机制提供依据.[方法]选用SH-SY5Y细胞,将实验分为空白对照组(加入正常培养基)、阳性对照组(加入终浓度为10 μmol·L-1的铁死亡诱导剂Erastin)、NaAsO2染毒组(NaAsO2终浓度分别为20、40、80 μmol·L-1)、抑制剂组[终浓度20 μmol·L-1凋亡抑制剂Z-VAD-FMK,10 μmol·L-1特异性铁死亡抑制剂Fer-1,100 μmol·L-1特异性铁死亡抑制剂去铁胺(DFO),20 μmol·L-1坏死性凋亡抑制剂Nec-1]、干预组(在阳性对照组及NaAsO2各染毒组基础上分别加入4种抑制剂,剂量同抑制剂组),共25组,染毒24h.实验重复3次.采用CCK-8法检测各组细胞存活率;试剂盒检测细胞内丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GPXS)活性及Fe2+含量;流式细胞仪检测脂质活性氧(ROS)水平.[结果]随NaAsO2染毒剂量增加,SH-SY5Y细胞存活率呈下降趋势(b=-0.984,P＜0.001);20、40、80μmol·L-1 NaAsO2染毒组及Erastin组细胞存活率[(85.15±1.32)％、(72.63±2.67)％、(65.28±1.71)％、(74.34±2.07)％]均明显低于对照组存活率(P＜0.01).Z-VAD-FMK干预使20、40、80 μmol·L-1 NaAsO2染毒组及Erastin处理组细胞存活率上升至(88.30±1.92)％、(81.72±2.43)％、(77.72±1.05)％、(85.28±1.97)％(P＜0.05),脂质ROS、MDA含量下降(P＜0.05),SOD活性上升(P＜0.05),但GSH含量、GPXS活性、Fe2+含量均无明显变化(P＞0.05).Fer-1、DFO干预使40 μmol·L-1和80 μmol·L-1 NaAsO2染毒组、Erastin处理组细胞存活率分别上升至(86.33±2.31)％、(82.24±1.24)％、(88.76±2.87)％和(82.83±2.55)％、(79.66±0.67)％、(87.38±1.23)％(P＜0.01),脂质ROS水平、MDA下降(P＜0.05),SOD活性上升(P＜0.05),同时GSH含量、GPXS活性上升(P＜0.05),Fe2+含量降低(P＜0.05).Nec-1干预NaAsO2各染毒组及Erastin处理组后,细胞存活率、脂质ROS水平、MDA含量、SOD活性、GSH含量、GPXS活性及Fe2+含量均无明显变化(P＞0.05).[结论]NaAsO2暴露可诱导SH-SY5Y细胞凋亡,随着暴露剂量的增加可诱导细胞铁死亡.