绵羊肺炎支原体和山羊伪结核棒状杆菌双重PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 林裕胜 肖义军 胡奇林 黄丽丽
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊肺炎支原体 伪结核棒状杆菌 双重PCR
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 44-50
• 页数: 7页
• 分类号: S852.62
• 字数: 4647字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2020.01.007

摘要

[目的]为实现临床上对绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)和山羊伪结核棒状杆菌(Corynebacteriumpseudotuberculosis,CP)两种病原混合感染的同时检测,建立Mo和CP的双重PCR检测方法.[方法]应用基于Mo的P80基因和CP的PLD基因设计两对特异性引物,对反应体系和条件进行优化,验证方法的特异性、灵敏性和重复性;应用该方法和单一PCR方法对临床收集的70份样品进行检测,比较检测结果.[结果]建立的Mo和CP的双重PCR检测方法能够同时扩增出Mo 700 bp和CP 290 bp左右的片段,而对其他羊病常见病原的DNA扩增均为阴性.Mo和CP的检测下限分别为1 530 pg,μL-1和3 500 pg,μL-1.该方法具有良好的重复性.临床样品检测结果显示:70份临床样品中Mo阳性率为25.71％,CP阳性率为18.57％,同时感染Mo和CP阳性率为7.14％,与单一PCR检测结果符合率为100％.[结论]本研究建立的双重PCR检测方法具有特异性强、灵敏性较高、重复性好等特点,为临床上Mo和CP混合感染的快速检测以及流行病学调查提供了实用方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡奇林	福建省农业科学院畜牧兽医研究所	57	410	11.0	17.0
2	肖义军	福建师范大学生命科学学院	52	218	9.0	12.0
3	林裕胜	福建省农业科学院畜牧兽医研究所	40	164	8.0	11.0
4	黄丽丽	福建师范大学生命科学学院	5	8	1.0	2.0