鼠疫菌聚合酶螺旋反应等温扩增方法的建立

• 作者: 刘威 张乔 张晓龙 施琦 杨燕 王静 田丽 高玉峰
• 来源期刊: 中国国境卫生检疫杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶螺旋反应 鼠疫菌 等温扩增
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 实验与研究
• 页码范围: 77-81
• 页数: 5页
• 分类号: R183.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.16408/j.1004-9770.2020.02.001

摘要

目的 用聚合酶螺旋反应(PSR)建立快速、灵敏、特异的鼠疫菌等温扩增方法.方法 根据鼠疫菌F1基因设计引物,利用Bst DNA聚合酶链置换活性,通过添加pH指示剂和核酸荧光染料SYBR Green Ⅰ,建立可视化PSR检测方法,并用于鼠脏器、血液、环境样本中鼠疫菌的检测.结果 建立的PSR方法可在40 min内得到结果,最佳反应温度为64℃,最低检测限为100拷贝/μl,与14株非鼠疫菌无交叉反应.可成功检测模拟阳性样本.结论 建立的PSR等温扩增反应为鼠疫菌的快速检测提供了新方法.