志贺氏菌实时荧光单引物等温扩增方法的建立及应用

• 作者: 李静 段永生 王建昌 王金凤 胡连霞
• 来源期刊: 食品科学技术学报
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光单引物等温扩增 志贺氏菌 ipaH基因
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 40-45
• 页数: 6页
• 分类号: TS207.4|R117
• 字数: 4369字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-6002.2015.06.007

摘要

以志贺氏菌ipaH基因特异序列为靶序列,设计RNA-DNA组合引物和链终止序列,优化反应体系,建立实时荧光单引物等温扩增检测志贺氏菌的方法,反应时间为44 min.通过对4株不同群志贺氏菌和12株其他食源性致病菌进行实时荧光单引物等温扩增检测,结果表明,除4株志贺氏菌外,其他细菌均未扩增出荧光曲线.进一步研究表明,采用普通热裂解法提取DNA,实时荧光检测福氏志贺氏菌DNA的灵敏度为1.16 fg/μL,纯培养菌液的灵敏度为1.3 CFU/mL;对牛奶模拟样品中福氏志贺氏菌的检出限是1.8CFU/mL.研究结果表明,实时荧光单引物等温扩增检测志贺氏菌灵敏度高、特异性强、耗时短、方法简便.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡连霞	河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心	12	81	5.0	8.0
2	段永生	河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心	9	38	4.0	5.0
3	李静	河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心	15	41	4.0	5.0
4	王建昌	河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心	38	161	6.0	10.0
5	王金凤	河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心	25	113	5.0	9.0