TRPM8激活Calcineurin-NFATc3通路调节结肠癌细胞免疫逃逸

• 作者: 刘国军 黄绪群
• 来源期刊: 中国癌症防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠癌 免疫逃逸 增殖 凋亡 TRPM8
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 310-316
• 页数: 7页
• 分类号: R735.3+5
• 字数: 4873字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5671.2020.03.13

摘要

目的 探讨TRPM8调节结肠癌细胞免疫逃逸的机制.方法 采用qRT-PCR和Western blot检测结肠癌细胞系SW620和正常人结肠上皮细胞系CCD 841 CoN中TRPM8的表达水平.将干涉和过表达TRPM8载体TRPM8siRNA和pcDNA3.1-TRPM8转染至SW620细胞,并设置相应对照组(Control siRNA组和pcDNA3.1组),用CCK-8、集落形成实验和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡,酶标仪检测Calcineurin活性,Western blot检测Calcineurin-NFATc3信号通路相关蛋白的表达.采用CCK-8检测CD8+T细胞与SW620细胞共孵育的细胞活力,Western blot检测Calcineurin特异性抑制剂FK506处理SW620细胞后NFATc3和PD-L1蛋白表达.结果 与CCD 841 CoN细胞相比,TRPM8 mRNA和蛋白在SW620细胞中的表达均增加(P＜0.01).与Control siRNA组比较,干涉TRPM8表达后SW620细胞活力、细胞增殖能力、Calcineurin活性,以及TRPM8、PD-L1和NFATc3蛋白表达均降低(P＜0.01),而细胞凋亡率和p-NFATc3蛋白表达均升高(P＜0.01);过表达TRPM8可增强细胞活力、细胞增殖能力和Calcineurin活性,上调TRPM8、PD-L1及NFATc3蛋白表达(P＜0.01),下调p-NFATc3蛋白表达(P=0.002).CD8+T细胞与干涉TRPM8表达的SW620细胞共孵育后总细胞活力降低(P=0.002),而与过表达SW620细胞共孵育后总细胞活力增强(P=0.005).FK506处理可抑制SW620细胞Calcineurin活性,下调NFATc3、PD-L1蛋白表达(P＜0.01).结论 TRPM8过表达可能通过激活Calcineurin-NFATc3信号通路而促进PD-L1表达,从而增强结肠癌细胞免疫逃逸能力,促进结肠癌细胞增殖.