MiR-186-5p对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响研究

• 作者: 堵晶晶 廖坤 张锫文 张顺华 朱砺 王定国 辜浩 郭鑫宇
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 3T3-L1前脂肪细胞 miR-186-5p 分化 增殖 Wnt5a Mapk1
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 21-30
• 页数: 10页
• 分类号: Q819
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.1907035

摘要

目的:探究miR-186-5p对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响及其潜在的分子机制.方法:qRT-PCR检测miR-186-5p在不同周龄小鼠白色脂肪组织及3T3-L1前脂肪细胞增殖分化过程中的表达变化;通过脂质体将miR-186-5pmimics、inhibitors转染入增殖液或分化液培养的3T3-L1细胞后,利用CCK-8、EdU和qRT-PCR检测3T3-L1前脂肪细胞增殖变化,油红O染色观察其脂滴形态;通过生物信息软件TargetScan和双荧光报告系统分别对miR-186-5p靶基因进行预测和确认.结果:(1) miR-186-5p在1～6周龄小鼠的白色脂肪组织及3T3-L1前脂肪细胞自然分化过程中表达量均逐渐上调.(2)与阴性对照相比,mimics或inhibitors转染分别显著地促进或抑制了miR-186-5p的表达.(3)过表达miR-186-5p后,3T3-L1前脂肪细胞的增殖速率减慢,脂滴增大增多;而抑制miR-186-5p后,3T3-L1前脂肪细胞增殖速率增快,脂滴数量减少,且粒径变小.其中过表达miR-186-5p显著地降低了野生型Wnt5a和Mapk1 3'-UTR活性,而突变相应的绑定位点可解除该抑制作用.结论:miR-186-5p可抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖,且通过直接靶向Wnt5a和Mapk1以促进其分化为成熟脂肪细胞.