双糖链蛋白聚糖对小鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中神经元凋亡的影响

• 作者: 古龙 周牮 尹世刚 庞金伟 张丽芳 彭建华 江涌 谢雨珂 郭科成 陈礼刚
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 关键词: 蛛网膜下腔出血 早期脑损伤 双糖链蛋白聚糖 神经元 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 138-145
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2020.02.006

摘要

目的 探讨双糖链蛋白聚糖(BGN)对小鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤(EBI)中神经元凋亡的影响. 方法 采用改良血管内穿刺法构建C57BL/6J雄性野生型小鼠SAH模型.(1)将48只小鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH 6 h组、SAH 12 h组、SAH 24 h组、SAH 48h组、SAH 72 h组,每组8只.采用Western blotting及荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测各组小鼠脑组织中BGN蛋白及mRNA的表达水平.(2)将16只小鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH 48h组,每组8只.采用免疫荧光双标染色检测各组小鼠脑组织中BGN在神经元中的表达情况.(3)将24只小鼠按随机数字表法分为假手术组、假手术+空载病毒组、假手术+BGN慢病毒组,每组8只,其中BGN慢病毒及空载病毒于假手术前7d经侧脑室注射.采用qRT-PCR检测各组小鼠脑组织中BGN mRNA的表达水平.(4)将48只小鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH+空载病毒组、SAH+BGN慢病毒组,每组16只,其中BGN慢病毒及空载病毒于造模前7d经侧脑室注射.采用改良加西亚评分及平衡木实验评估各组小鼠的神经功能,采用TUNEL染色检测各组小鼠脑组织中神经元凋亡情况,采用Westem blotting检测各组小鼠脑组织中磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)及核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达水平. 结果 (1)SAH 48 h组小鼠脑组织中BGN蛋白及mRNA的表达水平达高峰,与假手术组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)SAH 48 h组小鼠脑组织中BGN大量表达于神经元中.(3)与假手术+空载病毒组比较,假手术+BGN慢病毒组小鼠脑组织中BGN mRNA的表达水平明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).(4)与SAH+空载病毒组比较,SAH+BGN慢病毒组小鼠的改良加西亚评分、平衡木实验评分均明显升高[(6.125±1.246)分vs.(13.000±1.309)分;(1.125±1.126)分vs.(2.875±0.835)分],神经元凋亡比例明显降低[(51.950±11.166)％ vs.(31.938±7.705)％],p-NF-κB/NF-κB比值明显降低(1.161±0.156 vs.0.886±0.142),差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 抑制BGN表达可有效减轻小鼠SAH后EBI中神经元凋亡,从而改善其神经功能.