鸡传染性贫血病毒VP3蛋白的原核表达及其单克隆抗体的研制

• 作者: 史静柯 叶建强 宋昊 朱韩钰 杨海蓉 王鹏 秦爱建 袁慧莎 许文琳 邵红霞 钱琨 霍臣智
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性贫血病毒 VP3蛋白 原核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 55-60
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.2
• 字数: 3621字
• 语种: 中文

摘要

本研究首先利用同源重组一步克隆法将鸡传染性贫血病病毒(CIAV)的VP3基因克隆到pGEX-6P-1原核表达载体上,经IPTG诱导及SDS-PAGE分析成功获得了重组蛋白rGST-VP3的表达.随即以纯化的重组蛋白rGST-VP3免疫Balb/c小鼠,通过脾细胞与SP2/0细胞融合以及间接免疫荧光(IFA)筛选,获得2株稳定分泌CIAV-VP3抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8;亚型鉴定表明,CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8均为IgG1;效价测定发现,CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8的腹水间接免疫荧光效价分别为1:102400与1:12800;Western blot进一步证实,CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8均能识别重组蛋白rGST-VP3.本研究结果为后期研究VP3蛋白在CIAV致病中作用及其诱导凋亡分子机制奠定了坚实的物质基础.