高通量测序应用于PCOS患者卵泡液外泌体lncRNA表达谱分析

• 作者: 刘琳 吕芳 张晓梅 王丽萍 王欣 王静怡
• 来源期刊: 生殖医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 多囊卵巢综合征 外泌体 长链非编码RNA 基因测序
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 620-627
• 页数: 8页
• 分类号: R711.6
• 字数: 3951字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3845.2020.05.011

摘要

目的 研究多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵泡液外泌体内差异 lncRNA的表达,探究差异表达 lncRNA的分子功能及代谢途径和信号通路. 方法 收集2018年1～12月于苏北人民医院生殖中心就诊的56例不孕患者卵泡液并记录相关临床资料.其中 PCOS导致的不孕患者为 PCOS组(n＝28),输卵管不通导致的非 PCOS 不孕患者为对照组(n＝28).利用超高速离心法分离卵泡液外泌体,透射电子显微镜(TEM)观察其大小和形态,纳米颗粒跟踪分析(NTA)以及Western Blot鉴定分离获得的外泌体,提取外泌体总 RNA.随机选取两组各3份卵泡液外泌体 RNA 进行 lncRNA 高通量测序,鉴定差异 lncRNA并进行 GO富集和 KEGG通路等生物信息学分析,选取6个差异基因通过 RT-qPCR 验证测序结果. 结果 两组患者的年龄、总孕酮、雌激素(E2)、FSH、获卵数、可移植胚胎数等均无显著差异(P＞0.05);体重指数(BMI)、LH 和窦卵泡数均存在显著差异(P＜0.05).外泌体 RNA测序结果显示,PCOS患者外泌体共检测到1866个差异表达 lncRNA基因,其中1253个基因表达上调,613个基因表达下调.GO 富集和 KEGG通路分析表明,差异 lncRNA 主要富集于组织细胞成分或生物发生等生物学过程,以及卵母细胞减数分裂和胰岛素抵抗等信号通路.RT-qPCR验证差异lncRNA基因的表达结果与测序一致. 结论 PCOS患者外泌体中 lncRNA存在差异表达,提示 lncRNA在 PCOS的发病中发挥一定作用.