微小核糖核酸-125b-5p抑制Caspase 2蛋白酶活性缓解脂多糖诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激的研究

• 作者: 姚维 康利 杜鹏 聂文玉 董雪妮 贺珍珍
• 来源期刊: 心肺血管病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微小核糖核酸-125b-5p Caspase 2 H9c2 细胞凋亡 氧化应激
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 605-611,616
• 页数: 8页
• 分类号: R54
• 字数: 5887字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5062.2020.05.028

摘要

目的:MicroRNAs是一种转录后调控靶基因的非编码小RNA,被认为是心脏功能和疾病的重要调节剂,心脏损伤伴随着MicroRNAs表达的动态变化.本研究以脂多糖(LPS)诱导损伤制备H9c2心肌细胞氧化应激性损伤模型,探究miR-125b-5p对Caspase 2蛋白酶活性和LPS诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激的影响.方法:采用LPS诱导损伤制备H9c2心肌细胞氧化应激性损伤模型,将miR-125b-5p转染于LPS诱导的H9c2心肌细胞中.RT-PCR检测miR-125b-5p和Caspase 2的表达水平;荧光素酶报告实验确定miR-125b-5p和Caspase 2的靶向关系;流式细胞术检测细胞凋亡;免疫印迹检测Caspase-2,Caspase-3,Caspase-9,Survivin,Bax/Bcl-2的蛋白表达;试剂盒检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量.结果:用LPS诱导处理能显著降低miR-125b-5p的表达水平(P＜0.05),促进Caspase 2表达(P＜0.05).荧光素酶报告实验表明Caspase 2上存在miR-125b-5p的结合位点,miR-125b-5p能靶向抑制Caspase 2活性(P＜0.05).miR-125b-5p可显著抑制Caspase 2蛋白表达水平(P＜0.05).miR-125b-5p能明显促进H9c2心肌细胞增殖(P＜0.05).miR-125b-5p能显著抑制H9c2心肌细胞凋亡(P＜0.05).同时,miR-125b-5p还能显著抑制裂解的caspase-3、caspase-9和Bax/Bcl-2蛋白水平(P＜0.05),促进Survivin的蛋白表达(P＜0.05).miR-125b-5p可明显降低培养液中LDH活性和细胞内MDA、GSH含量、增加胞内SOD活性(P＜0.05).结论:miR-125b-5p通过抑制Caspase 2蛋白酶活性,促进心肌细胞增殖,降低心肌细胞凋亡率,缓解了LPS诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激,表明miR-125b-5p对LPS造成的心肌细胞损伤具有保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜鹏	武汉大学附属医院心血管内科	5	65	4.0	5.0
2	董雪妮	武汉大学附属医院心血管内科	1	0	0.0	0.0