高危型人乳头瘤病毒16 E6蛋白通过外泌体传递热休克蛋白70调控巨噬细胞介导宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移

• 作者: 向贇 孙红 王军 肖晗 袁纯辉
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: HPV16 E6蛋白 HSP70 宫颈癌 巨噬细胞 增殖 侵袭 迁移
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 538-546
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112309-20200301-00089

摘要

目的 初步探讨高危型人乳头瘤病毒16(human papillomavirus 16,HPV 16) E6蛋白促进宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的潜在免疫调控分子机制.方法 构建HPV16 E6蛋白过表达慢病毒并感染C33A细胞,获得C33A-E6稳定细胞系,采用qRT-PCR和Western blot法检测C33A和C33A-E6组细胞内HSP70的表达.放线菌素D(ActD)和放线菌酮(CHX)处理细胞后不同时间采用qRT-PCR和Western bkt法分别检测HSP70 mRNA和蛋白质降解速率.超速离心法提取两组细胞外泌体,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外泌体中HSP70含量.提取C33A和C33A-E6细胞干扰HSP70表达后的外泌体,EHSA检测经外泌体处理的THP-1细胞培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的表达水平.将外泌体处理的THP-1细胞与C33A细胞共培养,CCK-8法检测C33A细胞增殖.Tran-swel1小室评估C33A细胞侵袭和迁移状态.结果 与C33A细胞相比,C33A-E6细胞HSP70 mRNA水平显著增高(P＜0.05),但蛋白质水平没有明显变化(P＞0.05).经ActD/CHX处理不同时间的两组细胞中HSP70 mRNA和蛋白质降解速率差异无统计学意义(P＞0.05),但C33A-E6组分泌的外泌体中HSP70含量明显增高(P＜0.001).C33A-E6细胞分泌的外泌体可增强THP-1细胞分泌IL-6、TNF-α和IL-10的水平(P＜0.001),并且外泌体处理后的THP-1细胞可促进C33A细胞增殖、迁移和侵袭(P＜0.001);而干扰C33A-E6细胞中HSP70的表达可显著降低外泌体诱导的THP-1细胞分泌IL-6和IL-10及THP-1细胞对C33A细胞增殖、迁移和侵袭的促进作用(P＜0.001).结论 高危型HPV16 E6蛋白可上调宫颈癌细胞外泌体中HSP70的表达,进而促进巨噬细胞分泌IL-6和IL-10,并介导宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王军	华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院检验科	137	782	14.0	21.0
2	肖晗	华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院妇儿健康研究所	6	12	2.0	3.0
3	向贇	华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院检验科	7	31	3.0	5.0
4	孙红	华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院检验科	6	19	3.0	4.0
5	袁纯辉	华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院检验科	7	16	3.0	4.0