用于CD47靶向研究的细胞模型的构建

• 作者: 梅恩典 沈俊杰 钱程 陈雪娇
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: CHO-CD47 细胞模型 CD47 CHO
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1348-1355
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2020.08.0006

摘要

CD47是一个新的免疫检查点,然而人源细胞广泛表达CD47,且暂未发现CD47阴性的人源细胞,使CD47靶向研究缺乏可靠的研究模型.该研究以中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞为基础,制备人源CD47慢病毒,进而感染CHO构建CHO-CD47细胞系.利用流式细胞术、反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)及生物结合检测,对CHO-CD47进行评估,流式检测结果表明,CHO-CD47细胞表达人源CD47的阳性率为94.7％,经冻融且10次传代后,CD47阳性率保持稳定(96.4％);RNA水平检测结果表明,CHO-CD47细胞中表达人源CD47 mRNA;此外,蛋白水平检测结果显示,CHO-CD47细胞可成功结合人源CD47配体信号调节蛋白α(signalregulatoryprotein α,SIRPα)和信号调节蛋白γ(signal regulatory protein γ,SIRPγ)重组蛋白.综上所述,CHO-CD47细胞模型成功构建,可用于CD47靶向研究的结合能力验证,为CD47靶向研究提供可靠的研究模型,为以CD47为靶点的癌症治疗研究提供一定研究基础.