miR-506-3p通过靶向MTDH增加前列腺癌细胞的化学敏感性

• 作者: 何朗 侯赞 孟又胜 戴刚毅 曾贵林 李光俊 柏森 王雪桃 薛志红
• 来源期刊: 局解手术学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-506-3p MTDH 靶向抑制 前列腺癌 细胞的化学敏感性
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 347-353
• 页数: 7页
• 分类号: R737.25
• 字数: 5644字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11659/jjssx.09E019024

摘要

目的 研究miR-506-3p对前列腺癌细胞化学敏感性的影响及其作用机制.方法 用RT-qPCR检测miR-506-3p和MTDH在前列腺癌细胞系和正常前列腺细胞系中的表达水平;以紫杉醇为诱导药物构建人前列腺癌耐药细胞株PC-3/PTX,将PC-3/PTX细胞随机分为5组:对照组、NC mimic组、miR-506-3p mimic组、LV-MTDH组、mimic+MTDH组,利用Lipofectamine 3000转染试剂盒分别转染对应质粒.检测其存活率、IC50值、克隆细胞数目、凋亡率以及凋亡相关蛋白的表达水平;构建MTDH野生型(WT)和突变型(MUT),用双荧光素酶报告基因实验验证miR-506-3p与MTDH之间的靶向关系;Western blot检测miR-506-3p mim-ic处理后PC-3/PTX细胞中MTDH的蛋白表达水平.结果 miR-506-3p在前列腺癌细胞中低表达,而MTDH高表达;miR-506-3p在PC-3/PTX细胞中的表达量显著低于在前列腺癌细胞PC-3中的表达量;相比于对照组和NC mimic组,miR-506-3p mimic组的PC-3/PTX细胞的存活率、IC50值、克隆细胞数目及Bcl-2表达明显降低,凋亡率及Bax表达明显升高;MTDH野生型较突变型能使荧光素酶活性显著下降;miR-506-3p mimic组PC-3/PTX细胞中MTDH蛋白表达水平显著低于对照组和NC mimic组;相比于对照组,miR-506-3p mimic组中PC-3/PTX细胞克隆数目显著减少,凋亡率升高,而LV-MTDH组与之相反;相比于LV-MTDH组,mimic+MTDH组PC-3/PTX细胞中MTDH的表达量显著下降,细胞克隆数目减少,凋亡率升高.结论 miR-506-3p通过靶向抑制MTDH的表达能增强人前列腺癌耐药细胞株PC-3/PTX的化学敏感性.