CRISPR/Cas9基因编辑技术介导SST基因敲除细胞的制备

• 作者: 任红艳 华再东 毕延震 王紫君 肖红卫
• 来源期刊: 江西农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: CRISPR/Cas9 基因编辑 SST基因 猪 敲除
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 70-75
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 4353字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19386/j.cnki.jxnyxb.2020.08.12

摘要

利用CRISPR/Cas9基因编辑技术制备了SST基因敲除的细胞.在猪SST基因第一外显子区域设计2个向导RNA(sgRNA),用PX459构建成表达质粒,电转染猪胎儿的成纤维细胞,在48 h后用嘌呤霉素筛选细胞.通过PCR扩增、测序检测,在获得的13个克隆中,有2株细胞未检测到基因敲除,4株细胞发生单等位基因敲除,7株细胞为双等位基因删除.筛选到的纯合子单克隆细胞可用于制备SST基因删除猪.