ALV-J、REV和MDV多重荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 刘丽娜 刘鹏 周康 李丽 汪最 汪琛 罗青平
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽白血病病毒 网状内皮增生症病毒 马立克病病毒 多重荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 73-78
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.3
• 语种: 中文

摘要

为建立可同时检测J亚群禽白血病病毒(ALV)、网状内皮增生症病毒(REV)和马立克病病毒(MDV)的方法,本研究以ALV-J的ENV基因、REV的LTR区以及MDV的MEQ基因为检测对象,建立了可同时检测ALV-J、REV、MDV的多重荧光定量PCR方法并对其特异性、灵敏性、稳定性进行了研究.结果显示,该方法仅可特异扩增3种肿瘤病病毒的基因,对禽流感病毒、新城疫病毒、腺病毒等核酸扩增均呈阴性;ALV-J、REV和MDV的最低核酸检测限分别为35 copies/μL、5.1 copies/μL和62 copies/μL;此外,批内与批间重复试验Ct值的变异系数均小于2％.利用此方法对166份送检样品进行检测,其中ALV-J、REV和MDV检出率分别为25.3％、7.2％和5.4％,混合感染检出率为3.6％.以上结果表明,本方法特异性好、灵敏度高、稳定性强,能够同时检测ALV-J、REV和MDV,可用于禽肿瘤病的鉴别诊断、流行病学调查以及疫病防控.