鲤疱疹病毒Ⅱ型RAA-LFD检测方法的建立

• 作者: 吕晓楠 张文 徐立蒲 曹欢 王姝 王小亮 王静波
• 来源期刊: 检验检疫学刊
• 学科: 农学
• 关键词: 鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2) 重组酶介导扩增(RAA) 侧向流试纸条(LFD)
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: S941.41

摘要

为了建立一种简便、快捷的现地检测鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)的方法,本文联合重组酶介导扩增(RAA)和侧向流试纸条(LFD)技术,在优选的RAA下游引物和探针的5’端分别进行生物素(Biotin)和荧光(FAM)标记,通过对RAA反应时间和温度等条件的优化,建立了可用于现地检测CyHV-2的RAA-LFD方法。该检测方法在34℃~40℃恒温下反应10 min即可实现对CyHV-2目的基因片段的有效扩增,与其他常见水生动物疫病病原脱氧核糖核酸(DNA)无交叉反应,RAA扩增产物可直接用LFD肉眼观察,对标准质粒pUC57-CyHV-2的最低检测限为8拷贝/μL,比普通聚合酶链式反应(PCR)灵敏度高出10倍。组内和组间重复性试验表明该方法有良好的重复性和稳定性,使用该方法对45份临床样本进行检测,与普通PCR结果符合率为95%。本文建立的RAA-LFD检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好、操作方便,可用于CyHV-2的临床快速检测。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐立蒲		95	615	14.0	21.0
2	王静波		65	207	8.0	11.0
3	曹欢		66	250	10.0	12.0
4	王小亮		57	189	8.0	11.0
5	王姝		64	201	9.0	11.0
6	张文		34	75	5.0	7.0
7	吕晓楠		15	6	1.0	2.0