基于三步荧光定量PCR技术揭示不同产区白酒酿造系统中Lactobacillus sp.的分布特征

• 作者: 吴群 徐岩 杜如冰
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 中国白酒 定量 荧光定量PCR 未培养乳杆菌 Lactobacillus sp.
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 工业微生物学
• 页码范围: 1-12
• 页数: 12页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.190150

摘要

[背景]Lactobacillus sp.是一株存在于白酒酿造系统中的功能微生物,但是针对Lactobacillus sp.的定量方法及其在中国白酒酿造系统中的分布尚未被研究.[目的]建立一种基于特异性引物的荧光定量PCR定量方法,并应用于实际生产检测,揭示Lactobacillus sp.在中国白酒酿造系统中的分布特征.[方法]基于16S rRNA基因序列设计特异性引物,并通过PCR验证引物特异性;优化荧光定量PCR反应程序,提高引物扩增效率;定量分析所采集样本中Lactobacillus sp.的含量,揭示Lactobacillus sp.在中国白酒酿造系统中的分布特征.[结果]设计了一对扩增产物大小为445bp的特异性引物.通过优化扩增条件,构建含有变性、退火、延伸过程的三步荧光定量PCR方法,该方法扩增线性较强,R2＞0.99;灵敏度高,定量限为17.9 copies/μL;重复性好,Ct值的变异系数小于1％.跟踪检测全国10个产区代表产地的白酒酿造系统,其中8个产区均检测到Lactobacillus sp.,在相同产地不同酿造工艺的酿造系统中均检测到Lactobacillus sp.,但是含量上有显著差异.山东潍坊产地的芝麻香型白酒发酵体系含量最高(7.27±0.04 lgcopies/g),跟踪发酵时间样本发现Lactobacillus sp.的生长分为两个阶段;生长期(0-15 d)和稳定期(15-45 d).[结论]基于特异性引物所建立的三步荧光定量PCR技术可实现对白酒酿造系统中Lactobacillus sp.的鉴定和定量,通过跟踪检测发现Lactobacillus sp.广泛分布在中国白酒发酵体系中,其中产地决定Lactobacillus sp.的分布,酿造工艺影响含量,在发酵过程中Lactobacillus sp.的含量具有明显的动态变化规律,为进一步研究该菌在发酵过程中的功能提供参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐岩	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院酿造微生物学与应用酶学研究室	34	280	10.0	15.0
2	吴群	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院酿造微生物学与应用酶学研究室	15	114	7.0	10.0
3	杜如冰	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院酿造微生物学与应用酶学研究室	1	0	0.0	0.0