茶树CsSNAT基因的克隆与表达分析

• 作者: 师聪 韦朝领 颜小梅
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 茶树 5-羟色胺-N-乙酰转移酶 基因克隆 原核表达 表达分析
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 939-947
• 页数: 9页
• 字数: 6413字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2020.05.0939

摘要

为明确茶树SNAT基因的序列特征和表达特点,在茶树转录组测序的基础上以茶树(Camellia sinensis)品种舒茶早为试验材料,通过SMARTTM RACE技术克隆茶树褪黑素合成途径中关键限速酶5-羟色胺-N-乙酰转移酶CsSNAT基因的cDNA全长序列,并分析其基因结构和表达模式.结果 表明,CsSNAT基因序列全长1 014 bp,其中包含742 bp的完整开放阅读框(ORF),编码247个氨基酸,预测等电点7.64,蛋白分子量27.36 kDa.氨基酸序列比对显示,CsSNAT蛋白与其他高等植物的SNAT蛋白具有较高同源性,与葡萄VvSNAT(CBI31163)同源性最高,为66.19％.诱导蛋白最佳条件为温度28℃,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度0.5 mg·L-1,诱导时间6h,在上清液中可获得大量分子量为66 kDa的可溶性融合蛋白.实时定量PCR分析表明,CsSNAT在褪黑素处理6h后表达量最高,为对照的3倍;茶尺蠖取食6h后,CsSNAT表达显著上调.不同激素处理结果显示,CsSNAT受脱落酸(ABA)、茉莉酸甲酯(MeJA)和水杨酸(SA)诱导表达.本研究结果为5-羟色胺-N-乙酰转移酶功能研究奠定了一定的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韦朝领	安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室	49	905	15.0	29.0
2	颜小梅	安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室	1	0	0.0	0.0